蛋白質(zhì)組學(xué)可以利用蛋白微數(shù)列、電泳和質(zhì)譜分析法檢測(cè)、識(shí)別和特征標(biāo)記的蛋白進(jìn)行分析。這些方法有其獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)和局限性,根據(jù)各自能力評(píng)估蛋白質(zhì)組譜。
細(xì)胞裂解成分一般使用的是表面活性劑,常用的有曲拉通X-100(Triton X-100)、脫氧膽(deoxycholate)、乙基苯基聚乙二醇(Nonidet P40,NP-40)、十二烷基磺酸鈉(SDS)。其中Triton X-100和NP-40為非離子型,deoxycholate和SDS為離子型。不同裂解成分的裂解強(qiáng)度不同,一般來(lái)說(shuō)Triton X-100和SDS的裂解能力較強(qiáng),deoxycholate和NP-40的裂解效果較為溫和,可以根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)需求選用不同的裂解液。
標(biāo)準(zhǔn)品的制備是非常復(fù)雜的問(wèn)題,也是標(biāo)記免疫分析中比較難于制備的一個(gè)成分。以下討論的是實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)品(或商品化試劑中標(biāo)準(zhǔn)品)的制備。
標(biāo)準(zhǔn)品是標(biāo)記免疫分析定量的依據(jù)。標(biāo)準(zhǔn)品的正確與否直接影響樣品的測(cè)定結(jié)果。如果在連續(xù)測(cè)定中,或各實(shí)驗(yàn)室之間使用的標(biāo)準(zhǔn)品不一致,則可影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可比性。為此,對(duì)標(biāo)記免疫分析所使用的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)滿足如下要求。