為了避免雜菌污染，獲得微生物純培養(yǎng)物，培養(yǎng)基必須及時嚴(yán)格滅菌。通常采用高壓蒸汽滅菌。一般培養(yǎng)基用0. IMPa (121℃)維持15 ~ 30min即可徹底滅菌。長時間的高溫滅菌會使某些不耐熱的物質(zhì)破壞，如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖。因此，含糖培養(yǎng)基常用0.05MPa (110℃) 滅菌20 ~ 30min某些對糖類要求更高的培養(yǎng)基，可先將糖過濾除菌或間歇滅菌，再與其他已滅菌的成分混合。
TRIzol試劑有多組分分離作用,與其他方法如硫氰酸胍/酚法、酚／SDS法、鹽酸胍法、硫氰酸胍法等相比，最大特點(diǎn)是可同時分離一個樣品的RNA\DNA\蛋白質(zhì)．TRIzol使樣品勻漿化，細(xì)胞裂解，溶解細(xì)胞內(nèi)含物，同時因含有RNase抑制劑可保持RNA的完整性。在加入lv仿離心后，溶液分為水相和有機(jī)相，RNA在水相中。取出水相用異丙醇沉淀可回收RNA；用乙醇沉淀中間層可回收DNA；用異丙醇沉淀有機(jī)相可回收蛋白質(zhì)。
最好新鮮組織，這樣RNA提取的效果比較好，這是肯定的。如果不是新鮮的（最好在半年之內(nèi)，-80℃或者液氮中凍存的）組織，注意不要反復(fù)凍融，從冰凍狀態(tài)拿到0-4℃，注意不要拿到常溫，待組織解凍后，用 DEPC泡過的剪刀剪一小塊組織，稱重后，放到預(yù)冷的勻漿器中，然后加入一定量的TRIZOL試劑，然后勻漿。
分子生物學(xué)是指在分子水平上研究生命現(xiàn)象的科學(xué)，從生物大分子(核酸、蛋白質(zhì))的結(jié)構(gòu)、功能和生物合成等方面來闡明各種生命現(xiàn)象的本質(zhì)。研究內(nèi)容包括各種生命過程，如光合作用、發(fā)育的分子機(jī)制、神經(jīng)活動的機(jī)理、癌的發(fā)生等。
高純試劑是反映化學(xué)試劑純度高低的一個類別概念，它表示，該試劑中起干擾作用離子的相對量很少；該試劑可以被用于一般的定量分析實驗。比如，色譜用的乙腈，是一種高純試劑。
細(xì)胞中的DNA合成有兩條途徑：一條途徑是生物合成途徑（“D途徑”），即由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，為DNA分子的合成提供原料。在此合成過程中，葉酸作為重要的輔酶參與這一過程，而HAT培養(yǎng)液中氨基蝶呤是一種葉酸的拮抗物，可以阻斷DNA合成的“D途徑”。
組蛋白是構(gòu)成真核生物染色體的基本結(jié)構(gòu)蛋白，富含帶正電荷的Arg和Lys等堿性氨基酸，等電點(diǎn)一般在pH10.0以上，屬堿性蛋白質(zhì)，可以和酸性的DNA緊密結(jié)合，而且一般不要求特殊的核苷酸序列。
細(xì)胞融合(cell fusion)，細(xì)胞遺傳學(xué)名詞，是在自發(fā)或人工誘導(dǎo)下，兩個細(xì)胞或原生質(zhì)體融合形成一個雜種細(xì)胞。基本過程包括細(xì)胞融合形成異核體(heterokaryon)、異核體通過細(xì)胞有絲分裂進(jìn)行核融合、最終形成單核的雜種細(xì)胞。細(xì)胞融合可作為一種實驗方法被廣泛適用于單克隆抗體的制備，膜蛋白的研究。
制備1%瓊脂糖凝膠(大膠用70ml,小膠用50ml):稱取0.7 g(0.5 g)瓊脂糖置于錐形瓶中,加入70 ml(50ml)1×TAE,瓶口倒扣小燒杯.微波爐加熱煮沸3次至瓊脂糖全部融化,搖勻,即成1.0%瓊脂糖凝膠液。
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