細(xì)胞凋亡通常稱為細(xì)胞程序性死亡，是由基因控制的主動性細(xì)胞死亡過程。越來越多數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞凋亡與多種疾病密切相關(guān)，如癌細(xì)胞具有連續(xù)增殖、抵抗細(xì)胞凋亡能力，利用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡可為腫瘤診斷，療效評價(jià)和預(yù)后預(yù)測提供了重要的參考指標(biāo)。
分離質(zhì)粒 DNA 與提取 RNA 或基因組 DNA 的提取方式是不相同的，因?yàn)楸仨氋|(zhì)粒與基因組 DNA 必須分離。如果此刻，您加入離液劑將立即釋放所有物質(zhì)，并且無法將小環(huán)狀 DNA 與高分子量染色體區(qū)別開來。因此，在質(zhì)粒制備過程中中，直到裂解后才加入離液劑，鹽用于結(jié)合。
酶與抗體交聯(lián)的方法有許多種,根據(jù)酶的結(jié)構(gòu)不同可采用不同的方法。對于制備HRP結(jié)合物，可用戊二醛二步法和過碘酸鈉法。尤以簡易過碘酸鈉法更為常用。
本實(shí)驗(yàn)用簡易過碘酸鈉法進(jìn)行HRP標(biāo)記抗體。本法是以NaIO4先將HRP表面的糖分子氧化成醛基，然后再與Ig上的氨基相結(jié)合，所獲酶標(biāo)記抗體的產(chǎn)率高，將近70%的HRP和Ig結(jié)合，99%的Ig與酶結(jié)合，酶與Ig的活性無重大損失，是目前最常用的方法。
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是以特性量值的均勻性、穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性等特性為主要特征的。為獲得這些基本特征，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)起碼應(yīng)滿足以下基本條件的要求。
當(dāng)FITC在堿性溶液中與抗體蛋白反應(yīng)時，主要是蛋白質(zhì)上賴氨酸的r氨基與熒光素的硫碳胺鍵（thiocarbmide）結(jié)合，形成FITC-蛋白質(zhì)結(jié)合物，即熒光抗體或熒光結(jié)合物。一個IgG分子中有86個賴氨酸殘基，一般zui多能結(jié)合15～20個，一個IgG分子可結(jié)合2～8個分子的FITC
熒光色素是最常用于標(biāo)記抗體的標(biāo)記物之一。熒光素經(jīng)恰當(dāng)?shù)募ぐl(fā)可發(fā)光，從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況，主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色，是一種非常好的亞細(xì)胞水平精確定位的方法。
可溶于水的物質(zhì)，容易成為水溶液流失。因此，回收時要加以注意。但是，對甲醇、乙醇及醋酸之類溶劑，能被細(xì)菌作用而易于分解。故對這類溶劑的稀溶液，經(jīng)用大量水稀釋后，即可排放。
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