菌種是用于發(fā)酵過程中作為活細(xì)胞催化劑的微生物,是指食用菌、工業(yè)菌、農(nóng)用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料,其中包括細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌四大類。菌株是一種菌類系列中一個(gè)品種,表示同種微生物不同來源的純種培養(yǎng),從自然界中分離得到的每一個(gè)微生物純培養(yǎng)都可稱一個(gè)菌株。
各種單糖和麥芽糖是還原糖,蔗糖和淀粉是非還原糖。利用溶解度不同,可將植物樣品中的單糖、雙糖和多糖分別提取出來,再用酸水解法使沒有還原性的雙糖和多糖徹底水解成有還原性的單糖。在堿性條件下,還原糖將3,5-二硝基水楊酸還原為3-氨基-5-硝基水楊酸(棕紅色物質(zhì)),還原糖則被氧化成糖酸及其它產(chǎn)物,在一定范圍內(nèi),還原糖的量與棕紅色物質(zhì)深淺的程度呈一定的比例關(guān)系,在540nm 波長下測(cè)定棕紅色物質(zhì)的消光值,查對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算,便可分別求出樣品中還原糖和總糖的含量。多糖水解時(shí),在單糖殘基上加了一分子水,因而在計(jì)算中須扣除已加入的水量,測(cè)定所得的總糖量乘以0.9 即為實(shí)際的總糖量。
鉀是人體所必需的一種微量元素,一般水果和蔬菜中都含有大量的鉀。但是由于高鉀對(duì)心臟是有抑制作用的,當(dāng)身體內(nèi)鉀的含量過高會(huì)對(duì)身體造成巨大的危害,輕者四肢、嘴角麻木,心率減慢低于60次/分鐘;重者會(huì)造成心跳呼吸驟停。因而需要鉀單元素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。
天然Ig分子含有四條異源性多肽鏈,其中,分子量較大的兩條鏈稱為重鏈(heavy chain,H),而分子量較小的兩條鏈稱為輕鏈(Light chain,L)。同一Ig分子中的兩條H鏈和兩條L鏈的氨基酸組成完全相同。
具備緩沖作用的緩沖溶液,通常針對(duì)溶液中放入一定量的酸和堿,能夠起到防止溶液PH值產(chǎn)生一定變化的良好作用。一般來說,弱酸以及其鹽溶液混合而成的溶液、弱堿與其鹽溶液進(jìn)行混合的溶液等,都可以被稱為緩沖溶液。能夠產(chǎn)生對(duì)酸的緩沖作用,是由于其中的弱酸根離子的原因。如果向該溶液里面滴加定量的強(qiáng)酸物質(zhì),氫離子勢(shì)必要被弱酸根離子消耗完。這樣就能維持PH的固定值,使其不會(huì)變化。如果加入適量強(qiáng)堿,溶液里的弱酸會(huì)消耗氫氧根離子,從而阻礙PH發(fā)生改變。
普通PCR所用的一對(duì)引物中有一個(gè)引物加多了,為正常的三倍只要引物特異性比較好,那么不會(huì)產(chǎn)生大的影響。如果恰巧是加多的這條引物不是很特異的話,也許會(huì)擴(kuò)出來非特異帶。
培養(yǎng)細(xì)胞至對(duì)數(shù)生長期,細(xì)胞以胰酶消化計(jì)數(shù)后,用細(xì)胞計(jì)數(shù)測(cè)出細(xì)胞密度,每孔接種 5×104 個(gè)細(xì)胞,添加細(xì)胞培養(yǎng)液至 500μL。通常情況下,該接種量的 H1299 或 293T 細(xì)胞在感染后第 3 天可生長至 80%-90% 融合度。(接種目的細(xì)胞時(shí),請(qǐng)根據(jù)細(xì)胞的實(shí)際生長速度調(diào)整接種量,使目的細(xì)胞感染后第 3 天生長至 80%-90% 融合度)
與Southern或Northern雜交方法類似,但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測(cè)物是蛋白質(zhì),“探針”是抗體,“顯色”用標(biāo)記的二抗。經(jīng)過PAGE分離的蛋白質(zhì)樣品,轉(zhuǎn)移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì),且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學(xué)活性不變。以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,與對(duì)應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng),再與酶或同位素標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng),經(jīng)過底物顯色或放射自顯影以檢測(cè)電泳分離的特異性目的基因表達(dá)的蛋白成分。該技術(shù)也廣泛應(yīng)用于檢測(cè)蛋白水平的表達(dá)。既可以定性,又可以半定量的Western是初步鑒定蛋白質(zhì)最方便也是最通用的方法。
細(xì)菌的芽胞具有厚而致密的壁,透性低,不易著色,若用一般染色法只能使菌體著色而芽胞不著色(芽孢呈無色透明狀)。芽孢染色法就是根據(jù)芽孢既難以染色而一旦染上色后又難以脫色這一特點(diǎn)而設(shè)計(jì)的。所有的芽孢染色法都基于同一個(gè)原則:除了用著色力強(qiáng)的染料外,還需要加熱,以促進(jìn)芽孢著色。當(dāng)染芽孢時(shí),菌體也會(huì)著色,然后水洗,芽孢染上的顏色難以滲出,而菌體會(huì)脫色。然后用對(duì)比度強(qiáng)的染料對(duì)菌體復(fù)染,使菌體和芽孢呈現(xiàn)出不同的顏色,因而能更明顯地襯托出芽孢,便于觀察。
牛血清白蛋白是血液中的主要成分(38g/100ml),分子量68kD,等電點(diǎn)4.8,含氮量16%,含糖量0.08%,僅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581個(gè)氨基酸殘基組成,其中35個(gè)半胱氨酸組成17個(gè)二硫鍵,在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。牛血清蛋白溶液可以作為測(cè)量蛋白質(zhì)含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線用。