標準品是標記免疫分析定量的依據(jù)。標準品的正確與否直接影響樣品的測定結(jié)果。如果在連續(xù)測定中,或各實驗室之間使用的標準品不一致,則可影響到實驗結(jié)果的可比性。為此,對標記免疫分析所使用的標準品應(yīng)滿足如下要求。
蛋白質(zhì)溶液用透析除鹽時,正負離子透過半透膜的速度不相同,如(NH4)2SO4中的?透析速度快,而透析過程中膜內(nèi)的?會生成H2SO4,使膜內(nèi)蛋白質(zhì)溶液呈酸性。因此,為避免蛋白質(zhì)變性,用鹽析法純化蛋白質(zhì)時,開始時應(yīng)用0.1mol/L的NH4OH透析。此外,為了保證蛋白質(zhì)在透析過程中不發(fā)生變性,可以將透析過程置于低溫下進行。
降解問題是RNA制備中常常到的問題。因為在 RNA 提取過程中,樣品儲存不當或裂解效率低等情況都會導致降解。對于 DNA 提取,降解不是一個大問題,因為對于 PCR,DNA 可以被剪切并且工作正常,如果不希望有較多剪切的 DNA,可以使用弱裂解的方法。
PCR技術(shù)問世于上世紀80年代。問世之初的PCR體系比較大,動輒以毫升計?,F(xiàn)在的PCR體系要精巧多了,總體積可大可小。我們常接觸到的常規(guī)PCR以及熒光定量PCR的體系一般都在幾十微升,小到可以10微升左右。
培養(yǎng)基既是提供細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細胞生長和繁殖的生存環(huán)境,培養(yǎng)基種類很多。
DNA片段瓊脂糖凝膠電泳的原理與蛋白質(zhì)的電泳原理基本相同,DNA分子在高于其等電點的pH溶液中帶負電荷,在電場中向正極移動。DNA分子在電場中通過介質(zhì)而泳動,除電荷效應(yīng)外,凝膠介質(zhì)還有分子篩效應(yīng),與分子大小及構(gòu)想有關(guān)。
不同熒光基團的熒光強度是有高有低的,例如FAM就是一個熒光強度相對較高的基團,我們偏向于將其安排給相對表達量比較低的目的基因,而熒光強度相對較低的基團可以用于檢測表達量比較高的如看家基因等,這樣會達到擴增曲線平臺期接近的目的,結(jié)果會比較美觀。
RT-PCR一般情況下是指反轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription),盡管有些資料上說實時熒光定量PCR也(realtime fluores-cence quantitative PCR)也簡稱RT-PCR,但是這是不對的,不推薦。
本研究的目的在于展示Arium pro VF系統(tǒng)產(chǎn)生的超純水所具有的內(nèi)毒素含量遠遠低于規(guī)定的限值,因而可用于上述各種應(yīng)用。
每種待測物都有一個可測定的濃度或活性規(guī)模,樣品成果若超越此規(guī)模,分析儀將顯示成果超越規(guī)模的提示。表明試劑現(xiàn)已變質(zhì),應(yīng)更換合格試劑。