培養(yǎng)基與菌種分離
培養(yǎng)基與菌種分離是從含有多種微生物的樣品中獲得純種微生物的操作技術(shù)。菌種分離主要在培養(yǎng)皿上進(jìn)行,常用的方法是稀釋法和劃線法。使用這兩種方法的目的是是微生物的一個(gè)個(gè)體通過(guò)繁殖,在固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出肉眼能見(jiàn)的群體,根據(jù)培養(yǎng)特征,用接種針調(diào)取所需菌種并在顯微鏡下檢查,證明為單一形狀的菌體。常用的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基。
如分離分解纖維素的微生物用的培養(yǎng)基是以纖維素為碳源的培養(yǎng)基,因?yàn)閺倪@種培養(yǎng)基上長(zhǎng)出來(lái)的只能是分解纖維素的微生物。
細(xì)菌的純種分離和接種技術(shù)中,需要注意的事項(xiàng)有:稀釋度的問(wèn)題純種分離的時(shí)候,無(wú)非是把菌液稀釋一定梯度后,涂布在諸如LB培養(yǎng)基上。
如果沒(méi)有稀釋好,就會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌長(zhǎng)得太密,或者是細(xì)菌根本不長(zhǎng)。最優(yōu)的稀釋梯度是最后在平板上的菌落數(shù)在30至300之間。此時(shí),能清楚地看清菌落的形態(tài),便于挑取單菌落。
基本形態(tài)與大小有以下幾種類型:
①單球菌:?jiǎn)为?dú)存在,如尿素小球菌;
②雙球菌:如肺炎雙球菌;
③鏈球菌:如乳酸鏈球菌;
④四聯(lián)球菌:形成的4個(gè)細(xì)胞排列在一起,成田字,如四聯(lián)球菌;
⑤八疊球菌:如尿素生孢八疊球菌;
⑥葡萄球菌:如金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)。
長(zhǎng)寬相差較大的棒桿狀或長(zhǎng)桿狀菌,如枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、梭狀桿菌(Bacterium fusiformis);分枝狀或叉狀菌,如雙歧桿菌屬(Bifidobacterium);竹節(jié)狀(兩端平截),如炭疽芽孢桿菌(Bacillusanthracis)等。