rtpcr和實(shí)時(shí)熒光定量pcr區(qū)別如下:
1、所說(shuō)的PCR應(yīng)該就是最常規(guī)的PCR,以DNA為模板,通過(guò)上下游引物,實(shí)現(xiàn)DNA的擴(kuò)增。
2、RT-PCR一般情況下是指反轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription),盡管有些資料上說(shuō)實(shí)時(shí)熒光定量PCR也(realtime fluores-cence quantitative PCR)也簡(jiǎn)稱RT-PCR,但是這是不對(duì)的,不推薦。
基本操作過(guò)程是將所提取的RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,然后將所獲得的cDNA作為模板,設(shè)計(jì)引物進(jìn)行擴(kuò)增,是一種檢測(cè)基因表達(dá)的常用方法。
3、實(shí)時(shí)熒光定量PCR也就是Real-Time PCR,其最大的作用是檢測(cè)樣品中的初始DNA濃度。
至于三者的關(guān)系,RT-PCR和實(shí)時(shí)定量PCR應(yīng)該都屬于PCR,在RNA實(shí)驗(yàn)中,這二者都會(huì)應(yīng)用到。
例如你要比較2個(gè)組織中的某基因的表達(dá)差異,首先你要提取2個(gè)組織的總RNA,然后通過(guò)RT-PCR檢測(cè)該基因是否在2個(gè)組織中有表達(dá),然后通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR測(cè)定該基因在2個(gè)組織中的表達(dá)量是否具有顯著性差異。