原代細(xì)胞可用來(lái)轉(zhuǎn)染siRNA、antisense RNA、microRNA 等 200bp 以內(nèi)的小分子 RNA 和 DNA，可轉(zhuǎn)染絕大多數(shù)原代細(xì)胞。目前，無(wú)論國(guó)外還是國(guó)內(nèi)，原代細(xì)胞的核酸轉(zhuǎn)染都是個(gè)熱點(diǎn)難題，市場(chǎng)還缺乏真正有效的商品化的原代細(xì)胞核酸轉(zhuǎn)染試劑。原代細(xì)胞能夠高效轉(zhuǎn)染絕大多數(shù)原代細(xì)胞，獲得比較理想的基因敲除效果。甚至對(duì)一些活體寄生蟲幼蟲，也能獲得較為理想的轉(zhuǎn)染結(jié)果。對(duì)于大多數(shù)原代細(xì)胞，RFect PM 細(xì)胞轉(zhuǎn)染陽(yáng)性率都在 80%以上，而轉(zhuǎn)染細(xì)胞死亡率不到 10%。
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原代細(xì)胞分離和培養(yǎng)基本步驟
1、器官和組織的選擇
盡可能的去除不必要的組織和血跡。
2、原代細(xì)胞的分離
（1）應(yīng)用PriCells原代細(xì)胞分離試劑盒I、II、III。
（2）根據(jù)組織來(lái)源不同，可選用不同的PriCells原代細(xì)胞分離試劑盒。
3、原代細(xì)胞的培養(yǎng)：
（1）PriCells原代細(xì)胞特制培養(yǎng)基
（2）PriCells原代細(xì)胞特制添加物
（3）優(yōu)質(zhì)胎牛血清
4、細(xì)胞的培養(yǎng)和鑒定：
PriCells原代細(xì)胞鑒定試劑盒
4、原代細(xì)胞的傳代、保存
（1）傳代：依椐細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)，生長(zhǎng)的細(xì)胞1：2或1：3進(jìn)行傳代。
（2）保存：DMSO＋培養(yǎng)液＋血清
按下列順序降溫：室溫→4℃（20分鐘）→冰箱冷凍室（30分鐘）→超低溫冰箱（－80℃過(guò)夜）→液氮。
5、原代細(xì)胞的復(fù)蘇
（1）取出細(xì)胞，迅速放入37℃溫水中快速解凍。
（2）吸出細(xì)胞懸液，并加10倍以上培養(yǎng)液。
（3）用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后接種培養(yǎng)瓶，放入37℃CO2培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。
