免疫組化
免疫組化,是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理—抗原抗體反應(yīng),即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對其進(jìn)行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry)或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)(immunocytochemistry)。
實(shí)驗(yàn)流程:
切片脫蠟至水-抗原修復(fù)-3%的雙氧水處理-畫圈-血清封閉-一抗4℃過夜孵育-二抗室溫孵育-顯色-蘇木素染核-脫水、透明、封片-鏡檢
注意事項(xiàng):
(1)石蠟切片制片,組織取樣后應(yīng)立即放入固定液中,避免凍存;
(2)冰凍切片制片應(yīng)取用新鮮組織,以免抗原丟失;
(3)組織蠟塊可以保存很長時(shí)間,但是石蠟切片理論上不能超過半年。冰凍切片不能超過3個月
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