動物細胞培養(yǎng)的必需條件
在所有的細胞離體培養(yǎng)中，最困難的是動物細胞培養(yǎng)。下面是它所需要的特殊條件。
⑴血清：動物細胞離體培養(yǎng)常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生長必需因子，如激素、微量元素、礦物質和脂肪。在這里，血清等于是動物細胞離體培養(yǎng)的天然營養(yǎng)液。
⑵支持物：大多數(shù)動物細胞有貼壁生長的習慣。離體培養(yǎng)常用玻璃，塑料等作為支持物。
⑶氣體交換：二氧化碳和氧氣的比例要在細胞培養(yǎng)過程中不斷進行調節(jié)，不斷維持所需要的氣體條件。
動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)步驟
注：所有步驟應在無菌無毒的超凈工作臺進行。胰蛋白酶處理時間不宜過長。
取離體的動物組織，器官或細胞，剪碎并加入胰蛋白酶分解成單個細胞，配置形成細胞懸液。
制備動物細胞培養(yǎng)液體培養(yǎng)基（需加入血清，保證無菌無毒），將細胞接種至培養(yǎng)基，放入二氧化碳培養(yǎng)箱中進行初代培養(yǎng)。
當細胞增殖達到一定程度，出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象時，用胰蛋白酶再次處理，并用細胞懸液吹打貼壁生長的細胞。進行細胞計數(shù)。
依照計數(shù)結果，分瓶培養(yǎng)，進行傳代培養(yǎng)。獲得細胞系或細胞株。
